有类病毒不用怕，有不少好处｜杆状病毒昆虫细胞表达重组蛋白系统

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杆状病毒-昆虫细胞系统可以高效表达重组蛋白，已被广泛地应用于多种热门研究领域，如药物研发、生长因子研究、癌症相关蛋白研究、基因表达调控等。此系统表达的蛋白与天然病毒粒子有极为相似的空间结构，具有较好的抗原性和免疫原性，为基因工程疫苗和诊断试剂研究提供新思路。

由于杆状病毒的核衣壳内可以容纳较大片段的外源基因，而杆状病毒基因组可以在昆虫细胞核内进行复制和转录，因此建立了杆状病毒-昆虫细胞表达系统。重组杆状病毒感染昆虫细胞后，高水平表达外源基因。可对外源蛋白进行转录后加工作用，如糖基化、磷酸化、酰基化、正确的信号肽切割、蛋白水解以及适当的折叠作用，大大提高了重组蛋白的生物活性。外源基因可以在昆虫细胞内进行正确的折叠，表达出的蛋白在结构上更接近天然蛋白。

杆状病毒表达系统可以在同一个细胞内表达多个基因，因此用不同的重组病毒同时感染细胞时，可以在同一个转移载体上同时克隆两个外源基因，表达的重组蛋白经过翻译后修饰就会形成具有生物活性的异源二聚体或多聚体。

杆状病毒操作过程

杆状病毒仅存在于无脊椎动物中，在脊椎动物中无感染性，而且其启动子在哺乳动物细胞中也没有活性，因此，在表达癌症相关的蛋白或有潜在毒性蛋白方面有优势，具有较高的安全性。

杆状病毒图，来自wiki

昆虫细胞悬浮生长，整个操作流程简单，仅需要合适的无血清培养基，容易大规模表达重组蛋白。目前常用的细胞主要有Sf9、Sf21、Hi5、S2等。Sf9和Sf21来源于草地夜蛾蛹的卵巢组织，可以进行瞬时转染，适用于纯化、生产高滴度的病毒蛋白，以及表达重组蛋白如激酶。对于某些蛋白，Sf21细胞表达量会高于Sf9细胞。Hi5细胞系来源于粉纹夜蛾，表达重组病毒性能较高，更适合用来表达分泌型的重组蛋白，也可用于转染和空斑纯化。

培养基

我们经过多年的研发生产，实现了从基因构建到蛋白纯化的一站式操作。通过不断地的表达系统进行优化，不仅开发了适合高密度培养Sf9和Sf21细胞的无血清培养基，还可以进行高滴度病毒包装。在重组蛋白的表达规模上，可以同时平行进行近千个筛选实验，还使得生产规模从1L扩大到5L、20L甚至是100L，实现了重组蛋白的大规模制备。

杆状病毒与昆虫细胞的结合，解决了病毒学研究的一大难题。

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